Extraction des mitochondries de baies de raisin (Vitis vinifera)

Les mitochondries de baies de raisin (Vitis vinifera ont ete extraites et purifiees pour la premiere fois. Outre l'utilisation de fortes concentrations de polyvinylpyrrolidone pour eviter le tannage des proteines et un controle du pH pour neutraliser l'activite vacuolaire, l'originalite principale du protocole mis au point reside dans l'emploi de fortes concentrations d'osmoticum afin d'eviter la rupture des membranes mitochondriales. La purification sur gradient de Percoll permet d'obtenir des vitesses d'oxydation specifiques comparables avec celles des autres mitochondries vegetales. L'oxaloacetate exerce une forte inhibition sur l'oxydation du succinate et du malate, il est excrete de la matrice mitochondriale contre un gradient de concentration. La comparaison des proprietes des mitochondries de raisin etudiees in vitro aux caracteristiques respiratoires du fruit entier permet d'avancer l'hypothese que les mitochondries sont en condition d'anoxie partielle in situ lorsque le fruit est a maturite