热损伤诱导的tRNA碎片tRF-Ile-AAT-1抑制膀胱尿路上皮癌细胞的增殖与侵袭

目的探讨热损伤诱导高度恶性与低度恶性膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial cancer, BUC)细胞之间差异表达的tRNA碎片对BUC细胞增殖与侵袭的影响。 方法对高度恶性BUC细胞株T24和低度恶性BUC细胞株5637行热损伤处理。对热损伤前后细胞进行tRNA碎片(transfer RNA stress-induced fragments, tRFs)测序，筛选出热损伤后在T24中表达下降且在5637细胞中表达上升的tRFs，并对其行细胞株及临床标本RT-PCR检测及验证。构建目的tRF的单链模拟物(mimic)和反义链(inhibitor)，并转染至热损伤后的T24及5637细胞中，分组为: 相对应的Heat组、载体对照组、Mimic组、Inhibitor组。通过CCK-8、流式细胞术、Transwell实验检测tRF对BUC细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的调控作用。 结果通过测序及细胞株RT-PCR检测，所筛选出的tRFs分别为tRF-chrM.Ser-GCT、tRF-Ile-AAT-1，而只有tRF-Ile-AAT-1在低级别BUC患者行第2次经尿道膀胱肿瘤电切(transurethral resection of bladder tumor, TURBT)所取标本中表达量较第1次TURBT的标本显著升高[(1.61±0.16)倍，P 结论热损伤诱导的tRNA碎片tRF-Ile-AAT-1，可抑制BUC细胞的增殖与侵袭能力。