pcDNA3．1（＋）-MCP-1和pcDNA3．1（＋）-Gmo α真核表达质粒的构建及鉴定

目的：构建并鉴定真核表达质粒pcDNA3．1(+)-MCP-1和pcDNA3．1(+)—Gmoα．方法：据GeneBank中大鼠MCP-1和Groα cDNA序列设计并合成引物，提取急性胰腺炎模型大鼠总RNA，RT-PCR扩增，并将扩增产物TA克隆至pGEM—Teasy载体，然后分别双酶切pGEM—MCP-1和pGEM—Groα回收目的片段再克隆至真核表达载体pcDNA3．1(+)．结果：pcDNA3．1(+)-MCP—1和pcDNA3．1(+)-Groα真核表达质粒构建完成后，用限制性内切酶、PCR及DNA序列分析等多种方法进行鉴定，证实其构建成功．结论：pcDNA3．1(+)-MCP-1和pcDNA3．1(+)-Groα真核表达质粒构建成功，为进一步研究该真核表达质粒的免疫保护效果及制备急性胰腺炎pcDNA3．1(+)-MCP-1和pcDNA3．1(+)-Groα DNA疫苗奠定了基础．