Diversidade e bioprospecção de fungos endofíticos associados a Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (Barbatimão - Fabaceae)

Fungos endofiticos sao microrganismos que ocupam o interior de tecidos de plantas sem causar sintomas aparentes de doenca. Estes microrganismos podem ser encontrados em diferentes tipos vegetais e representam fontes promissoras de metabolitos bioativos de interesse farmacologico. Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (Fabaceae) e uma angiosperma de ampla distribuicao geografica e utilizada devido sua acao cicatrizante, antiinflamatoria, hemostatica, antimicrobiana, anti-septica e antidiarreica. Apesar de seu amplo emprego na medicina popular, nenhum trabalho foi realizado, ate o momento, com o objetivo de conhecer a micota endofitica associada a esta planta. Este trabalho teve como objetivo caracterizar a diversidade de fungos endofiticos associados a S. adstringens e avalia-los quanto a producao de metabolitos antifungicos, citotoxicos e antiparasitarios. Fragmentos de folhas e cascas de 30 individuos jovens e adultos de S. adstringens foram desinfestados superficialmente e inoculados em Agar Dextrose Batata (BDA). As placas foram incubadas por ate 60 dias e os fungos obtidos foram purificados em meio BDA. Das plantas jovens foram obtidos 200 isolados de fungos filamentosos e das plantas adultas, 147 isolados. Todos os isolados foram depositados na Colecao de Microrganismos e Celulas da Universidade Federal de Minas Gerais. De acordo com as caracteristicas macromorfologicas, os isolados foram agrupados em 99 morfotipos. Um representante de cada morfotipo foi selecionado para o sequenciamento da regiao ITS do gene do rRNA. Os isolados foram identificados foram pertencentes aos generos: Alternaria, Arthrobotrys, Aspergillus, Botryosphaeria, Cladosporium, Colletotrichum, Coniochaeta, Cytospora, Diaporthe, Fimetariella, Guignardia, Massarina, Muscodor, Neofusicoccum, Nigrospora, Paraconiothyrium, Penicillium, Pestalotiopsis, Phomopsis, Preussia, Pseudofusicoccum, Sordaria, Sporormiella, Trichoderma e Xylaria. Todos estes generos pertencem ao filo Ascomycota. Alem disso, tres taxons foram identificados como Diaporthales sp., Pezizales sp. e Glomerellaceae sp. A abundância dos taxons variou de 0,31 a 20,76%. Destes, Phomopsis sp., Diaporthe phaseolorum, Diaporthales sp. e Guignardia camelliae foram os mais abundantes. A diversidade de taxons foi avaliada em termos de riqueza e equitabilidade por meio dos indices de Shannon (H) e de Simpson. O maior valor de H foi atribuido a comunidadefungica associada as plantas adultas (H = 2,79), mas o indice de Simpson apresentou valores proximos entre plantas jovens e adultas (0,90 e 0,88), o que indica uma distribuicao homogenea dos taxons dentro de cada comunidade. Os fungos endofiticos foram cultivados em BDA por 15 dias e apos este periodo, o crescimento fungico e o meio de cultura foram tratados com etanol para obtencao dos extratos brutos. A atividade antifungica dos extratos foi avaliada pelo metodo de microdiluicao em placa utilizando como alvo linhagens de Candida albicans (ATCC 18804, 2.1A, 15.3C). O ensaio de toxicidade para celulas tumorais humanas foi avaliado utilizando-se as linhagens tumorais MCF-7 (mama) e TK-10 (renal). A acao antiparasitaria foi avaliada sobre a forma amastigota de Leishmania amazonensis. Na determinacao da atividade antifungica, 0,3% dos extratos foram promissores (apresentaram valores de inibicao maior ou igual a 70%), 5,2% medianamente promissores (apresentaram valores de inibicao entre 50-69%) e 94,5% nao promissores (apresentaram valores de inibicao menor ou igual a 49%) contra pelo menos uma linhagem alvo de C. albicans quando os extratos foram utilizados na concentracao de 100 g/mL. Ja nos testes dos extratos na concentracao de 250 g/mL, 13,7% dos extratos foram promissores, 56,8% medianamente promissores e 39,5% nao promissores. Nenhum extrato apresentou atividade contra L. amazonensis e 18,7% dos extratos fungicos foram ativos contra celulas tumorais humanas. Os fungos produtores de extratos ativos foram identificados como: Colletotrichum boninense, Diaporthe phaseolorum, Glomerellaceae sp., Guignardia mangiferae, Nigrospora oryzae, Penicillium sp., Pestalotiopsis clavispora, Phomopsis sp., Pseudofusicoccum sp. e Xylaria sp. Os resultados obtidos neste trabalho contribuem para o conhecimento da micota endofitica associada a S. adstringens. Os fungos endofiticos com extratos bioativos representam uma possivel fonte potencial de substâncias que podem ser utilizadas como prototipos para o desenvolvimento de novas drogas antimicrobianas e antitumorais