人神经母细胞瘤细胞株Nav1.5 Na~＋通道编码基因Nav1.5/SCN5A的克隆

目的克隆人神经母细胞瘤（Neuroblastoma,NB-1）细胞河豚毒抵抗型（TTX-R）Nav1.5Na＋通道编码基因Nav1.5/SCN5A。方法使用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法,对NB-1细胞TTX-R Nav1.5Na＋通道α亚单位编码基因Nav1.5/SCN5A进行克隆。结果人神经母细胞瘤Nav1.5Na＋通道编码基因Nav1.5/SCN5A命名为hNbR1,其开放阅读框架可编码2016个氨基酸残基。序列分析显示其与心肌Nav1.5/SCN5A基因（hH1）编码的氨基酸相似性达99.1%;在DⅠ/SS1-SS2之间,存在一个半胱氨酸（c373）残基,提示hNbR1为TTX-RNa＋通道;DⅠS3-S4之间一个位于第3号染色体的新的外显子（第6A外显子）编码了该通道α亚单位。另外,一个删除了DⅡ-Ⅲ之间第18外显子的选择性剪接体（hNbR1-2）被发现。结论 Nav1.5/SCN5A基因新的变构体参与编码神经肿瘤组织Nav1.5Na＋通道,同时发现该基因的一个新外显子参与编码该通道,且发现Nav1.5/SCN5A基因比以往所知具有更加广泛的表达。