一种适合杉木微量组织总 RNA 的提取方法

杉木 ( Cunninghamia lanceolate (Lamb.) Hook.) 是中国南方特有的速生用材树种，其组织富含多酚多糖， RNA 提取非常困难，特别是对于微量组织尤为明显。根据杉木的特点，本研究采用改良 CTAB 法，优化试剂用量，用冰取代液氮研磨样品，研究比较了杉木不同微量组织总 RNA 提取效果。研究结果表明，本方法可从起始量为 100 mg 、 50 mg 、 25 mg 和 10 mg 的杉木茎、叶、花、根组织中得到高质量总 RNA ，其中 100 mg 叶中得到总 RNA 的浓度最高为 223.5 ng /μ L ， A 260 / 280 为 1.86 ，而 10 mg 根中得到总 RNA 浓度为 29.6 ng /μ L ， A 260 / 280 为 1.64 。经琼脂糖凝胶电泳检测，所提总 RNA 条带清晰无拖尾，产量高、质量较好。进一步反转录后，利用特异引物进行扩增验证，发现扩增的片段条带清晰，得率高，片段大小符合预期。该结果为提取杉木微量组织总 RNA 提供参考，为推动杉木微量组织在转录水平上的研究提供了科学依据。