Embryogenèse somatique et transfert de gènes chez le cotonnier, Gossypium hirsutum L.

La transformation via Agrobacterium et la regeneration par embryogenese somatique est la methode la plus couramment utilisee pour l'obtention de cotonniers transgeniques. Bien que le cotonnier soit au quatrieme rang des plantes transgeniques cultivees dans le monde, en terme de surface, l'obtention de cotonniers transformes est encore un processus qui presente plusieurs limites majeures. Dans la plupart des methodes publiees, le delai de regeneration est encore le plus souvent de 8-10 mois auxquels il faut ajouter 5 a 6 mois pour obtenir les graines T1. Le taux de conversion des embryons somatiques en plantules est faible et on observe sur les plantes transferees en sol, differentes variations (developpement floral, sterilite totale ou partiel) induites par la culture in vitro. Differentes etudes ont ete conduites pour ameliorer les performances du procede de regeneration de cotonniers transformes: elles portent sur le choix de la souche d'A. tumefaciens, la sequence de milieux de culture, les conditions de developpement des embryons somatiques. Les rendements des differentes etapes depuis l'inoculation des explants par la souche d'Agrobacterium jusqu'a l'obtention de graines issues des transformants primaires sont presentes. Les cultures embryogenes sont anergiees et peuvent se multiplier pendant de nombreux mois sur des milieux depourvus de substances de croissance. Une difference tres significative du taux d'AIA endogene des cals primaires et des souches embryogenes a ete mise en evidence et permet d'expliquer le caractere anergie de ces cultures. Le procede est largement genotype dependant et nous travaillons avec une variete, la variete Coker 310, qui presente de bonnes potentialites de regeneration. Le materiel vegetal est constitue d'explants d' hypocotyles issus de germinations realisees en conditions aseptiques. Bien qu'il s'agisse de lignees pures, au sens du selectionneur, nous observons une forte variabilite de reponse entre lots de graine selon leur origine ainsi qu'au sein d'un meme lot. Une selection effectuee sur la base des performances en embryogenese a permis de reduire cette variabilite et d'augmenter le taux d'embryogenese. De plus, il a ete possible, en selectionnant les graines utilisees, d'obtenir la neoformation d'embryons sur des milieux depourvus de substances de croissance. (Resume d'auteur)