Mise au point d'une plateforme innovante de criblage et développement de nouvelles molécules anti-hépatite C

L'objectif de ce projet est de developper des molecules nom/elles, libres d'exploitation et ciblant la polymerase NS5B, la protease NS3 et la protease/helicase du virus de l'hepatite C (VHC). Mon travail de these a consiste a contribuer au developpement d'une plateforme cellulaire innovante dans son concept et radicalement differente de celles existantes. Le systeme double hybride en levure est utilise de maniere originale afin d'identifier des peptides « 3D-Sensors », sensibles aux changements | de conformation de la cible en presence de ligands connus. Le systeme est ensuite transfere en cellules humaines afin de developper la plateforme cellulaire « 3D»Screen ». Cette derniere a ete validee avec le recepteur a Festrogene alpha (ERα) et a demontre sa selectivite et sa robustesse. Le criblage d'une chimiotlieque a permis didentifier 7 molecules nouvelles alterant la conformation du recepteur ERα et dotees potentiellement d'un mecanisme d'action original. La polymerase NS5B et la proteine NS3 sont des cibles validees pour le controle de la implication du VHC. La plateforme appliquee a la polymerase NS5R a la protease NS3 ainsi qu'a la protease/helicase a montre sa pertinence pour Identification de molecules ciblant ces proteines. L'adaptation a un format de criblage a haut debit a permis d'identifier 12 molecules candidates anti-NS5B et 5 composes anti-protease NS3 confirmees en systeme replicon. Les proprietes uniques de la plateforme 3D-Screen ont egalement ete exploitees pour predire l'activite de composes sur un panel de mutants resistants a des inhibiteurs de la polymerase NS5B ou de la protease NS3 developpes par d'autres societes et testes en essais cliniques.