GEN MDR-1 y resistencia al imatinib en células K562

El tratamiento de la Leucemia Mieloide Cronica (LMC) con Imatinib puede fracasar por mutaciones en el dominio tirosina quinasa o amplificacion del gen BCR/ABL. Otros mecanismos de refractariedad pueden deberse a los genes de resistencia multiple a drogas (MDR). Objetivo: Investigar en la linea celular K562 (LMC resistente al Imatinib), la expresion del gen MDRl y los efectos de su inhibicion con Ciclosporina A (CyA). Metodos: Se sintetizo ADNc por retrotranscripcion del ARN total y se amplificaron por RT-PCR los genes BCR/ABL y MDRl con primers especificos. Se verifico la expresion de la glicoproteina P-gp (producto del gen MDRl) por inmunohistoquimica con 2 anticuerpos monoclonales (C494 y C2l9). Las celulas K562 fueron enfrentadas (24hs) con Imatinib (2uM), CyA (3ug/ml), Imatinib+Cy A. Se evaluaron apoptosis con naranja de acridina/bromuro de etidio (microscopia de fluorescencia) y funcion farmacorresistente de P-gp con Rhodamina-l23 (citometria de flujo). Resultados: La expresion del gen MDRl se confirmo tanto por RT-PCRcomo por inmunhistoquimica. La prueba funcional con Rhodamina-l23 indico que la P-gp fue inhibida por CyA o hipotermia. El tratamiento con Imatinib+Cy A triplico el porcentaje de apoptosis comparado con Imatinib solo. Conclusion: El gen MDRl jugaria un rol adicional en la resistencia al Imatinib. La Cy A u otros inhibido res de la P-gp, facilitaria la accion del Imatinib, induciendo mayor porcentaje de apoptosis en celulas BCR/ ABL positivas.(AU)