丹酚酸D对MPP + 损伤SH-SY5Y细胞线粒体功能和生物合成的影响

目的研究丹酚酸D(salvianolic acid D, SalD)对MPP + 损伤SH-SY5Y细胞线粒体功能和生物合成的影响及机制。 方法采用MPP + 损伤SH-SY5Y细胞模型，MTT法检测MPP + 对细胞的毒性作用，MTT和LDH法考察SalD对SH-SY5Y细胞活力的影响，AO/EB法检测细胞凋亡。应用DCFH-DA和MitoSOX分别检测细胞ROS及线粒体超氧化物水平，通过测定细胞内ATP水平以及线粒体膜电位变化，考察线粒体功能。qPCR检测MPP + 损伤细胞后，PGC-1α及其下游调控基因NRF1和TFAM的mRNA水平，Western blot及免疫荧光测定细胞中PGC-1α、NRF1和TFAM蛋白含量。 结果MPP + 可损伤SH-SY5Y细胞，导致细胞存活率明显降低为51.34%。0.1、1、5 μmol·L -1 SalD和5 mmol·L -1 NAC能够减轻MPP + 诱导的SH-SY5Y细胞损伤及LDH释放，其细胞存活率分别增加到67.98%、71.79%、76.91%、77.55%。并且，SalD能减少MPP + 诱导的细胞内ROS及线粒体超氧化物的升高，降低线粒体膜电位，改善线粒体功能。同时，SalD能够明显抑制MPP + 损伤导致的PGC-1α、NRF1、TFAM mRNA转录及表达降低。 结论SalD能够抑制MPP + 诱导的SH-SY5Y细胞损伤，保护线粒体功能和线粒体生物合成。