7S β-伴大豆球蛋白通过NF-κB信号通路引起IPEC-J2细胞的炎性反应

采用细胞体外培养技术，研究不同浓度7S β-伴大豆球蛋白对猪小肠上皮细胞（IPEC-J2细胞）的影响。试验分为A、B、C、D、E、F 6组，其中A为对照组，其余各组中分别添加1、5、10、5、5 mg·mL -1 的β-伴大豆球蛋白，并且在E和F组分别添加1 μ mol·L -1 NF-κB（PDTC）和iNOS（L-NAME）抑制剂。用CCK-8法检测各组细胞存活率，用ELISA法检测细胞NO、DAO、5-HT、IL-6和IL-10含量，用Western blot法检测细胞p-NF-κB p65、iNOS、COX-2的蛋白表达量，用qPCR法检测细胞 NF - κB p 65、 IKKβ 、 iNOS 、 IKKα 、 COX -2 mRNA的相对转录量。结果显示：β-伴大豆球蛋白降低IPEC-J2细胞存活率，添加PDTC和L-NAME增高IPEC-J2细胞存活率，促进NO、DAO、5-HT和IL-6的分泌，并降低IL-10的分泌，同时增加p-NF-κB p65、iNOS、COX-2的蛋白表达量及 NF - κB p 65、 IKK β、 iNOS 、 IKK α、 COX -2 mRNA的相对转录量，添加PDTC和L-NAME后抑制了β-伴大豆球蛋白的作用。结果表明，β-伴大豆球蛋白引起IPEC-J2细胞损伤，随浓度增大损伤增加，PDTC和L-NAME可以降低β-伴大豆球蛋白对细胞的作用。