纳米铜对大鼠肝毒性相关蛋白磷脂酰乙醇胺结合蛋白1（PEBP1）的分离鉴定及生物信息学分析

为筛选纳米铜对大即鼠（Rattusnoegicus）肝脏毒性的差异蛋白，探讨其毒性作用机制，本研究应用双向电泳（two dimensional gel electro-phoresis，2-DE）和质谱等蛋白质组学方法，分离和鉴定肝毒性相关差异蛋白，并利用荧光定量PCR验证和生物信息学分析。结果共筛选到显著差异表达的蛋白斑点共43个，其中下调的一个差异蛋白点1006被鉴定为磷脂酰乙醇胺结合蛋白1（phosphatidy lethanolamine—binding protein1，PEBP1）；荧光定量PCR验证与双向电泳结果一致。PEBP1蛋白的生物信息学分析表明其性质稳定，不存在信号肽，定位于细胞质，可能属于非分泌性蛋白，含磷脂酰乙醇胺结合蛋白家族信号位点^64TLVLTDPDAPsRKDPKFREWHH^86；主要二级结构元件为无规则卷曲和延伸链。同源性分析表明，大鼠PEBP1蛋白与其他9个物种有较高同源性，并构建了PEBP1蛋白的系统进化树。中毒组大鼠肝脏PEBP1蛋白表达下调，导致肝细胞线粒体功能障碍，可能是纳米铜发挥毒性作用的途径之一。