PKM 2基因沉默对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及侵袭的影响

目的: 探讨M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)下调对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及侵袭的影响。 方法: 采用免疫荧光技术检测MCF-7细胞中PKM2蛋白的表达。通过脂质体法将构建有PKM2-shRNA的重组质粒转入MCF-7细胞;分别采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测PKM2 mRNA和蛋白的表达水平;CCK-8法、FCM法和Transwell侵袭实验分别检测 PKM 2基因沉默后对MCF-7细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响;蛋白质印迹法检测对增殖相关蛋白c-myc和cyclin D1以及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响。 结果: 乳腺癌MCF-7细胞的细胞质及细胞核中均有PKM2的表达;PKM2-shRNA质粒转染MCF-7细胞48 h后,可明显下调MCF-7细胞中PKM2 mRNA及蛋白的表达水平( P 值均 P 值均 PKM 2基因的表达,可下调c-myc、cyclin D1和Bcl-2蛋白的表达水平( P 值均 P 结论: 转染PKM2-shRNA特异性干扰 PKM 2基因的表达后,能通过下调c-myc和cyclin D1的表达抑制细胞的增殖,通过下调Bcl-2的表达以及上调Bax的表达促进细胞的凋亡。