大豆球蛋白通过p38丝裂原活化蛋白激酶/c-Jun氨基端激酶信号通路引起猪小肠上皮细胞损伤

2019 
通过体外培养猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),研究不同浓度大豆球蛋白(11S)对猪小肠上皮细胞的影响。试验分为6组:A、B、C、D、E、F组,其中A组为对照组,其余各组分别在培养液中添加1、5、10、5、5 mg/mL的11S,并且在E、F组分别添加1 μmol/L的c-Jun氨基端激酶(JNK)和p38抑制剂。培养24 h后,用CCK-8法检测细胞存活率;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞一氧化氮(NO)、5-羟色胺(5-HT)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)含量;Western blot检测细胞磷酸化JNK(p-JNK)、磷酸化p38(p-p38)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达量;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞Bcl-2/Bcl-xL相关凋亡蛋白( Bad )、Bcl-2相关X蛋白( Bax )、 Bcl -2和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)mRNA相对表达量。结果表明:1)与A组相比,C、D组细胞存活率极显著降低( P P P P P P P P P P P P P Bcl -2/ Bax 极显著降低( P Bax / Bcl-xL 、 Bad 和caspase-3 mRNA相对表达量显著或极显著增加( P P Bcl -2/ Bax 极显著增加( P Bax / Bcl-xL 和caspase-3 mRNA相对表达量极显著降低( P Bad mRNA相对表达量极显著降低( P < 0.01)。结果说明,11S通过p38 MAPK/JNK信号通路引起猪小肠上皮细胞损伤。
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