Efeitos do exercício físico na regulação da ingestão alimentar e interação TRB3/Akt no hipotálamo de ratos obesos induzidos por dieta rica em gordura

A sinalizacao da insulina no hipotalamo desempenha papel crucial na manutencao da massa corporal. Uma vez ativada, a proteina Akt aumenta a fosforilacao do fator de transcricao FoxO1, que e um importante mediador da sinalizacao insulina no hipotalamo e estimula a transcricao de neuropeptideos anorexigenicos. Nesse contexto, devido a capacidade de se ligar diretamente a proteina quinase B (Akt), a Mammalian Homolog of Drosophila Tribbles 3 (TRB3) torna-se uma importante molecula de regulacao da sinalizacao da insulina. Em adicao, a sinalizacao do estresse de reticulo endoplasmatico (estresse de RE) via proteina quinase de reticulo endoplasmatico (pPERK) e um fator de transcricao mediador de apoptose denominado CHOP, e considerado como mecanismo responsavel pela super-expressao de TRB3 em roedores obesos e diabeticos. Por outro lado, o exercicio fisico e considerado uma das mais importantes estrategias nao farmacologicas para a prevencao e/ou tratamento da obesidade. O exercicio e capaz de proteger contra a inflamacao, o estresse de RE e aumentar a sinalizacao da insulina no hipotalamo de roedores obesos. Entretanto, os efeitos do exercicio agudo na modulacao da TRB3 nao foram descritos. O objetivo do presente estudo foi investigar o papel do exercicio agudo de natacao sobre a expressao da TRB3 e associacao TRB3/Akt no hipotalamo de roedores obesos. Foram utilizados ratos wistar divididos em tres grupos: Lean (controle magro), alimentados com uma racao padrao para roedores, DIO (alimentados com uma dieta rica em gordura), e DIO-EXE (submetidos a um protocolo de natacao aguda de exercicio). Para reforcar que o aumento da TRB3 esta associada com o estresse de RE, e que uma sessao aguda de exercicio e capaz de reverter esse aumento, usamos outros tres grupos: controle (Lean) recebendo uma infusao de veiculo intracerebroventricular (i.c.v.), magros que receberam i.c.v. de thapsigargina (indutor farmaologico de estresse de RE) e magros que receberam i.c.v. de thapsigargina e submetidos a um protocolo de exercicio agudo de natacao. O protocolo de exercicio fisico consistiu de uma sessao de natacao, composto por dois periodos de tres horas, com uma pausa de 45 minutos. Previamente a eutanasia dos animais, foram realizadas as analises da glicemia, insulinemia, sensibilidade a insulina e a mensuracao da ingestao alimentar no periodo de 12h. Quatro horas apos a ultima sessao de exercicio, o tecido hipotalâmico foi removido para analise de proteinas de interesse atraves das tecnicas de imunoprecipitacao, imunoblot e de PCR em tempo real. Como resultado, verificou-se que o exercicio reduziu os niveis de proteina TRB3 e a interacao entre a proteina TRB3 e Akt, aumentou a fosforilacao de FoxO1 e restaurou os efeitos anorexigenos de insulina no hipotalamo de ratos DIO-EXE. Alem disso, nossos resultados revelaram que a i.c.v. de thapsigargina bloqueou os efeitos anorexigenos mediados por insulina em ratos magros, e o exercicio fisico restaurou a acao da insulina e a fome, assim, os efeitos supressivos do exercicio agudo sobre os niveis de proteina TRB3 pode ser relacionada, no minimo em parte, pela reducao do estresse de RE em neuronios hipotalâmicos. Abstract