马铃薯C-8,7甾醇异构酶基因原核表达载体的构建和表达

2013 
为研究甾醇异构酶的功能以及制备抗体,分别构建了马铃薯c-8,7甾醇异构酶基因StSH携带和去除信号肽序列的原核表达载体pGEX-StSI1b和pGEX-StSIle,并在大肠杆菌BL21(DE3)工程菌株中优化了融合蛋白GST.StSIlb和GST-StSIlC的诱导表达条件.结果表明,在0.1,0.5,1.0mmol·L“的IPTG诱导下,2种融合蛋白GST-StSIlb和GST.StSIlc均能有效表达,并以1.0mmol·L^-1 PTG诱导的效果最好;从诱导表达的时间来看,3种浓度IPTG诱导3h后融合蛋白均开始表达,且表达量随着诱导时间的延长而逐渐增加,但在诱导9h后的表达量增加幅度不大,因此确定诱导融合蛋白GST-pStSIl表达的最佳IPTG浓度为1.0mmol·L^-1,诱导时间为9h.
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