Estandarización de modelo de perfusión renal en ratones

La tecnica de rinon ex vivo permite valorar la respuesta renal intrinseca permitiendo que las variables experimentales puedan ser controladas por el investigador. En los laboratorios del CIPFAR trabajamos para poner a punto el modelo de rinon aislado y perfundido, para lo cual empleamos ratones C57BL/6 y CD-1 machos. Realizamos laparatomia abdominal, localizamos y ligamos la seccion aortica, seguidamente, realizamos una incision en la arteria renal izquierda e introdujimos una canula acoplada a un microtubo de polietileno. A traves de la canula, los rinones aislados son conectados a un sistema de perfusion y expuestos a los contracturantes KCl (80mM) y fenilefrina (FE 10-5 M). Tambien obtuvimos curvas concentracion respuesta frente a acetilcolina (ACh 10-8–10-4M). Nuestros resultados revelan valores de presion basal de 36.8 ± 4.8 mmHg y 30.7 ± 14.2 mmHg para las cepas CD-1 y C57BL/6, respectivamente. La despolarizacion con KCl desarrollo un efecto contracturante maximo de 25.7 ± 16.0 mmHg para CD-1 y 63.8 ± 34.8 mmHg en ratones C57BL/6. El agente adrenergico FE, produjo contracciones maximas de 53.0 ± 29.6 mmHg en CD-1 y 66.1 ± 4.7 mmHg en C57BL/6. El efecto vasodilatador maximo inducido por ACh fue de 35.7 % ± 3.5 y 46.9 % ± 18.7 en CD-1 y C57BL/6, respectivamente.A la luz de este resultado, tanto el tiempo de exposicion, la manipulacion excesiva, la perfusion inadvertida de burbujas y la formacion de coagulos, pueden ser factores que disminuyan la viabilidad del endotelio renal. En cualquier caso, los datos de perfusion basal, asi como la reactividad frente a agentes contracturantes son pruebas de la viabilidad del tejido en ambos grupos de animales.