Mécanismes de l'instabilité des sites fragiles communs

Les sites fragiles communs (SFC) sont des loci instables en cas de stress replicatif et des lieux preferentiels de rearrangements dans les tumeurs. Les SFC sont associes aux plus grands genes du genome et il a ete propose que la transcription de ces genes soit a l'origine de cassures de l'ADN. Cependant, de nombreux grands genes transcrits ne sont pas fragiles. Un second modele, celui de notre laboratoire, associe la fragilite des SFC a un programme de replication particulier, combinant pauvrete en evenements d'initiation et replication tardive. Il serait alors possible que la transcription soit liee a leur programme de replication, ce qui conduirait a la fragilite. Pour mieux comprendre ces relations, j'ai modifie la transcription de deux grands genes et analyse les consequences sur leur replication et leur fragilite. Ces manipulations genetiques sont realisees dans le modele aviaire DT40, qui permet la modification ciblee d'ADN par recombinaison homologue avec une grande efficacite. De facon surprenante, j'ai observe que la fragilite d'un grand gene est diminuee aussi bien en abolissant sa transcription qu'en l'augmentant. J'ai etudie la densite en evenements d'initiation par peignage moleculaire au locus et le programme temporel de replication dans des clones presentant des niveaux differents de transcription. J'ai ainsi pu montrer que la surexpression massive de deux grands genes avance le programme temporel de la replication, les preservant de la fragilite. Au cours de ma these, j'ai donc montre que la transcription exerce des effets antagonistes sur la stabilite du genome, benefiques ou deleteres, selon le niveau d'expression des grands genes associes aux SFC.