Survival rates of mouse blastocyst vitrified in dimethylformamide based solutions associated with ethylene glicol or 1-2 propanediol

O objetivo deste estudo foi determinar o efeito da dimetilformamida (DF) associada com etileno glycol (EG) ou 1-2 propanediol (PROH) durante a vitrificacao, no desenvolvimento in vitro de blastocistos murinos. A toxicidade dos crioprotetores foi avaliada ao expor os embrioes as tres solucoes de equilibrio (ES) compostas pelas misturas de DF, EG ou PROH (10% v/v de cada) em mPBS + 0,5% PVA, em diferentes intervalos de tempo (1, 3 e 10min). Em um segundo experimento, os embrioes foram expostos as mesmas ES (durante 1 e 3min), seguido da exposicao as tres respectivas solucoes de vitrificacao (VS) (20% v/v de cada) durante 30seg. Apos 72 horas de cultivo in vitro, as taxas de expansao e eclosao dos embrioes expostos durante os periodos de 1 e 3min as solucoes de equilibrio ES1 e ES2 foram semelhantes. No entanto, os embrioes expostos durante 10min as solucoes de equilibrio com DF apresentaram taxas de sobrevivencia inferiores a solucao de EG-PROH (P<0,01). Alem disso, as taxas de sobrevivencia dos embrioes expostos a DF-PROH (ES+VS) foram menores que as dos embrioes expostos as outras solucoes (P<0,01). A vitrificacao dos blastocistos foi realizada apos a exposicao dos embrioes nas tres ES+VS (por 1min e 30seg, respectivamente), usando micropipetas de vidro (GMP). As taxas de sobrevivencia foram menores nos blastocistos vitrificados nas solucoes compostas por DF (3%-3/108 e 17,1%-19/111), em relacao a solucao EG-PROH (69%-73/105) (P<0,01). Em conclusao, a DF adicionada como crioprotetor as solucoes de vitrificacao apresenta efeitos deleterios na capacidade de desenvolvimento in vitro dos blastocistos murinos vitrificados.