RAZVOJ ANALIZNE METODE ZA DOLOČEVANJE ALKIL HALIDOV S PLINSKO KROMATOGRAFIJO V AKTIVNI FARMACEVTSKI UČINKOVINI

Glavna naloga farmacevtske industrije je pacientu zagotoviti varno in kvalitetno izdelano zdravilo. V zadnjem casu se veliko pozornosti posveca kontroli potencialnih genotoksicnih necistoc (PGI), saj le-te povzrocajo genske mutacije, kromosomske prelome ter preureditve, ki lahko vodijo v rakava obolenja. Dovoljena meja za vsebnost PGI-jev v zdravilih je obicajno zelo nizka (koncentracijski nivo µgg-1) in je odvisna od dnevnega odmerka. V skupino teh necistoc uvrscamo tudi alkil halide, ki lahko nastajajo kot stranski produkti razlicnih sinteznih stopenj, postopkov ciscenja (tvorba API soli) ali pa so kot reagenti prisotni v sintezi. Cilj dela je bil razvoj obcutljive in selektivne analizne metode, ki bo direktno omogocala dolocevanje alkil halidov (klorometana, kloroetana bromometana in bromoetana) v aktivni farmacevtski ucinkovini (API). Zaradi izredne hlapnosti analitov smo se razvoja analizne metode lotili s tehniko plinske kromatografije. Za uspesno locbo analitov smo z neposrednim injiciranjem standardnih raztopin v metanolu preizkusili polarne, srednje-polarne in tudi nepolarne »WCOT« kapilarne kolone v kombinaciji z razlicnimi detektorji. Najvecji izziv je bilo izbrati kolono, ki bo zagotovila utrezno locitev med analiti in topilom (metanol). Locitev smo dosegli na koloni DB-624 v kombinaciji z masno-selektivnim detektorjem (MSD). Po veckratnem neposrednem injiciranju raztopine vzorca smo ugotovilili slabo ponovljivost, nestabilnost bazne linije in slabo obliko kromatografskih vrhov. Neposredno injiciranje smo nato uspesno nadomestili z injiciranjem plinaste faze s tehniko nadprostora (HS - headspace). Analizno metodo smo optimirali in jo tudi validirali kot limitni test na nivoju 2 µgg-1 (µgml-1). Pri validaciji smo potrdili selektivnost analizne metode, ponovljivost injiciranja, ponovljivost metode (za vzorec in vzorec s standardnim dodatkom), tocnost ter robustnost. Z metodo smo nato analizirali realne vzorce izdelanega API-ja in potrdili ustreznost le-tega (vsebnost vseh analiziranih alkil halidov je bila pod mejo porocanja). Dobljeni rezultati so uradni del kontrolne strategije in so vkljuceni v registracijsko dokumentacijo.