Clonage et caracterisation de htaf#i#i30, une sous-unite du complexe tfiid humain

La regulation de l'expression des genes de classe ii (i. E. Les genes transcrits en arn messagers) est assuree chez les eucaryotes superieurs par trois familles de facteurs de transcription. La premiere est constituee des facteurs de transcription dits generaux qui, associes a l'arn pol ii constituent la machinerie transcriptionnelle de base. La seconde categorie comprend les facteurs regulateurs specifiques de tissus ou de cellules qui permettent une regulation fine et precise de l'expression spatio-temporelle des genes : ce sont les activateurs/represseurs transcriptionnels. Le troisieme groupee comprend les coactivateurs : ces facteurs permettent de faire le lien entre les modulateurs et la machinerie transcriptionnelle de base. Le facteur general de transcription tfiid, implique dans la transcription des genes par l'arn pol ii, est compose de la proteine de liaison a la boite tata (tbp) et de facteurs associes (facteurs associes a tbp ou taf#i#is). La proteine tbp lie la sequence tata et initie la formation du complexe de preinitiation. Les taf#i#is ont etes initialement caracterises comme des coactivateurs essentiels a l'activation de la transcription in vitro car la proteine tbp seule est incapable de permettre l'activation de la transcription dans un systeme in vitro. Les taf#i#is ne jouent pas uniquement un role dans l'activation de la transcription mais possedent aussi certaines fonctions de facteurs generaux comme la reconnaissance du promoteur minimal. La presente etude concerne la caracterisation de l'heterogeneite des complexes tfiid. Ce projet a aboutit au clonage de l'adnc et du gene codant pour un facteur humain associe a tbp dans le complexe tfiid, htaf#i#i30, qui n'est present que dans certaines sous-populations de complexes tfiid. La caracterisation de htaf#i#i30 a permis la separation physique et fonctionnelle de differents complexes tfiid. Dans un systeme de transcription in vitro, l'activation de la transcription par le recepteur des strogenes est dependante de la presence des complexes tfiid qui contiennent htaf#i#i30. Les complexes tfiid qui ne contiennent pas htaf#i#i30 permettent toujours l'activation de la transcription par le domaine d'activation de la transcription de la proteine vp16 du virus herpes simplex. Des etudes d'interactions in vitro ont montre que htaf#i#i30 interagit avec le domaine de liaison de l'hormone du recepteur des strogenes.