Caracterização de respostas antitumoral e antiangiogênica induzidas pelo tratamento com bisfosfonatos em linhagem celular derivada de câncer de mama

O comprometimento osseo em pacientes com câncer e responsavel por significativas morbidade e reducao da qualidade de vida, principalmente quando se trata de câncer de mama, no qual o esqueleto e o principal sitio de desenvolvimento das metastases. Bisfosfonatos (BPs) contendo ou nao nitrogenio sao os principais agentes usados no combate a perda ossea como na osteoporose, uma vez que induzem apoptose de osteoclastos. Recentemente foram demonstradas acoes antitumoral e antiangiogencia dos BPs, in vitro e in vivo. Desse modo, o objetivo deste trabalho foi analisar e comparar os efeitos antitumorais e antiangiogenicos de BP que nao contem nitrogenio (clodronato, CLO) e BP contendo nitrogenio (acido zoledronico, ZOL), em linhagem celular derivada de câncer de mama, MCF-7, e em culturas de celulas endoteliais. Os resultados mostram que ZOL reduziu a proliferacao das MCF-7 de maneira dose-dependente, com aumento do numero de celulas nas fases G0/G1, sem alterar a viabilidade. Paralemamente, CLO nao mostrou nenhum efeito sobre as celulas tumorais. O tratamento de celulas endoteliais de coelho, RAEC, com ZOL ou CLO reduziu a proliferacao celular derivada, sem alterar sua viabilidade. Celulas endoteliais humanas HUVEC mostraram 15% de reducao da viabilidade quando tratadas com ZOL, enquanto CLO nao mostrou efeitos citotoxicos. A incubacao de celulas HUVEC com meio condicionado por celulas MCF-7 tratadas com ZOL culminou na reducao da proliferacao das celulas endoteliais e na reducao da formacao de estruturas semelhantes a vasos, in vitro. Esse mesmo meio condicionado pelas celulas tumorais tratadas com ZOL resultou em menor proliferacao de celulas provenientes de aorta murina, em ensaio ex vivo. Ensaios de imunoabsorbância revelaram diminuicao nos niveis de VEGFA total nesse meio condicionado, assim como aumento da quantidade da isoforma antiangiogenica VEGFA165b, apos tratamento das MCF-7 com ZOL. Por ultimo, o tratamento das celulas MCF-7 com ZOL modulou a expressao de VEGFA total e de suas isoformas. Em conjunto, estes achados mostram que ZOL exibe acao antitumoral e antiangiogenica em celulas de câncer de mama e em celulas endoteliais. Tais dados contribuem para um maior esclarecimento sobre os mecanismos de acao dos BPs, permitindo buscas por melhorias no uso desses agentes como coadjuvantes na quimioterapia, a fim de minimizar a morbidade decorrente de metastases osseas em tumores malignos. Abstract