Production of monoclonal antibodies specific to human von Willebrand Factor

Um anticorpo monoclonal especifico para o fator von Willebrand (FvW) humano, o vW1E2, foi produzido imunizando-se camundongos da lihangem BALB/c com FVIII/FvW parcialmente purificado. A analise do anti-soro e a triagem dos hibridomas foram feitas por ELISA empregando anti-soro de coelho anti-FvW como anticorpo de captura do FvW plasmatico. A especificidade do vW1E2 ao FvW foi demonstrada testando-o contra plasmas de individuos normais, hemofilicos A e pacientes com DvW. Esta especificidade foi confirmada atraves de experimentos de imunoprecipitacao nos quais o FvWAg era precipitado do plasma pelo vW1E2 com auxilio de anti-soro de coelho anti-Ig de camundongo, como demonstrado por imunoelectroforese (EIA) e ELISA. Foi entao desenvolvido um ELISA, empregando o vW1E2, o qual foi avaliado como tecnica de quantificacao do FvWAg plasmatico. Foram testados amostras de plasmas de pacientes com DvW tipo I e tipo II, assim como de individuos normais e hemofilicos A. Os niveis de FvWAg obtidos por ELISA foram comparados aos obtidos por IEA observando-se uma correlacao significativa entre eles (r=0,735; GL=35; P