葛根素通过TLR4/Myd88/NF- κ B抑制NLRP3炎症小体抗大鼠心肌缺血再灌注损伤

本研究旨在探究葛根素对大鼠心肌缺血/再灌注（myocardial ischemia/reperfusion，MI/R）损伤的治疗作用及其机制。采用冠状动脉左前降支结扎60 min再灌注24 h制备大鼠MI/R损伤模型，于再灌注前20 min灌胃给予葛根素（10、30及100 mg·kg-1）。考察葛根素对心功能、心肌梗死范围、心肌损伤标志物、炎症因子及细胞凋亡的影响，并应用Western blot法检测Nod样受体蛋白3（Nod-like receptor protein 3，NLRP3）炎症小体和Toll样受体4/髓样分化因子88/激活核转录因子-κB（TLR4/Myd88/NF-κB）通路相关蛋白。所有动物实验均遵循中国医学科学院药物研究所伦理委员会的规定。结果显示，葛根素能够显著改善MI/R损伤大鼠的心功能，减小心肌梗死范围，降低血清中乳酸脱氢酶（lactic dehydrogenase，LDH）、天冬氨酸转氨酶（aspartate transaminase，AST）、肌酸激酶MB同工酶（creatine kinase-MB，CK-MB）和心肌肌钙蛋白T（cardiac troponin T，cTnT）的含量，抑制心肌细胞凋亡。此外，葛根素可以显著降低心肌炎症因子白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）的水平。Western blot分析结果显示，葛根素能够明显下调MI/R损伤大鼠心肌TLR4、Myd88及NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD，ASC）、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（cleaved-caspase 1）、切割型gasdermin-D（cleaved-GSDMD）、IL-1β、IL-18蛋白水平，同时减少NF-κB抑制蛋白α（inhibitor of NF-κB α，IκBα）、IκB激酶β（IκB kinase β，IKKβ）和NF-κB蛋白磷酸化。上述研究结果表明，葛根素对大鼠MI/R损伤具有明显的改善作用，其机制可能为通过下调TLR4/Myd88/NF-κB通路抑制NLRP3炎症小体激活，从而减轻炎症反应。