AVALIAÇÃO DE UM MÉTODO MOLECULAR PARA A DETECÇÃO DE MYCOBACTERYUM TUBERCULOSIS APLICADO AO DIAGNÓSTICO DA TUBERCULOSE PULMONAR.

A tuberculose, causada pelo Mycobacterium tuberculosis , e considerada uma das mais preocupantes doencas de notificacao compulsoria no Brasil. No Estado do Rio Grande do Sul a taxa de coinfeccao TB/HIV e o dobro do resto do pais e casos de multirresistencia as principais drogas do tratamento ja sao comuns. O diagnostico de rotina e o microbiologico, sendo constituido de baciloscopia e/ou cultura. Entretanto, a maioria dos locais utiliza apenas a baciloscopia que tem em torno de 50% de sensibilidade, fazendo com que exames complementares e a sintomatologia sejam necessarios para o fechamento de cada caso. O objetivo deste estudo foi avaliar uma metodologia molecular na identificacao de DNA de M. tuberculosis diretamente de amostras clinicas de escarro coletadas de pacientes atendidos no setor de tisiologia do municipio de Canoas (RS), sendo os resultados comparados com a cultura e baciloscopia. O DNA foi amplificado por PCR, apos a extracao com silica. A deteccao de DNA amplificado foi realizada por reacao colorimetrica em placas de ELISA sensibilizadas com sondas especificas do elemento de insercao IS 6110 do genoma. Foram analisadas 204 amostras de escarro quanto a presenca/ausencia de DNA genomico de M. tuberculosis frente a aplicacao do metodo descrito. Das 36 amostras positivas em cultura de M. tuberculosis , 28 foram positivas no teste. Das 168 amostras negativas em cultura, 152 negativaram ao uso do kit molecular. Os valores de falso positivos e falso negativos foram, respectivamente, 16 e 8 amostras. O valor de sensibilidade encontrado foi de 77%, enquanto a especificidade correspondeu a 90,5%. O valor preditivo positivo (VPP) foi 63% e o valor preditivo negativo (VPN) foi de 95%. Em se tratando da probabilidade pre-teste (prevalencia), o valor encontrado foi de 17,6%. O indice kappa, que diz respeito a concordância de resultados de metodos diagnosticos, foi de 0,63 (bom resultado e considerado substancial segundo a classificacao epidemiologica). Portanto, diante da avaliacao realizada, foi possivel concluir que o metodo de identificacao de DNA de Mycobacterium tuberculosis por hibridizacao reversa mostrou-se aplicavel e reprodutivel a rotina de um laboratorio de analises, bem como, ao desenvolvimento de novas tecnologias aplicaveis a saude publica.