嗜水气单胞菌 bamA 、 bamB 、 bamD 突变株的构建及其对外膜蛋白转运的影响

革兰氏阴性细菌的BAM（β-barrel assembly machinery）系统一般由BamA-E等5个亚基组成，以β-桶状外膜蛋白的结构对细菌的转运和正确折叠中起重要作用。目前对于BAM系统的研究大多集中在大肠杆菌、脑膜炎双球菌等细菌中，而在其他细菌中的相关功能还有待进一步研究。以嗜水气单胞菌为研究对象，首先利用同源重组技术，分别构建完成 bamA 、 bamB 、 bamD 的缺失突变株。尔后，利用SDS-PAGE检测技术对相应突变株差异外膜蛋白进行比较，并对这些差异蛋白进行质谱分析，共鉴定到7个差异蛋白，其中5个为外膜蛋白，2个为位于内膜上的蛋白酶。此外，还通过Western blotting对部分突变株外膜蛋白的表达进行验证。研究结果发现，嗜水气单胞菌BAM系统的突变不仅改变了其外膜蛋白表达，还影响了微生物的蛋白转运进程；且在系统中不同亚基对不同外膜蛋白的转运和表达效果也有所不同，结果提示了嗜水气单胞菌BAM转运系统的不同亚基存在特定外膜蛋白转运的特性。