苹果树腐烂病菌非核糖体多肽合成酶基因 VmNRPS12 的功能

目的非核糖体多肽合成酶(NRPS)在植物病原真菌与其寄主互作过程中发挥着重要作用，明确 VmNRPS12 基因在苹果树腐烂病菌致病过程中的功能，将为今后深入研究苹果树腐烂病菌NRPS作用机制提供理论依据。 方法基于苹果树腐烂病菌全基因组数据，得到 VmNRPS12 基因。运用 q RT-PCR技术分析 VmNRPS12 在侵染初期的表达水平，利用Double-joint PCR和PEG介导的原生质体转化获得该基因抗潮霉素的突变体，对突变体进行PCR检测及Southern blot验证得到敲除突变体，进一步通过重新导入该基因全长片段获得互补突变体，最后对野生型、敲除突变体和互补突变体进行菌落、产孢及致病力观察，对检测数据用SPSS软件进行差异显著性分析。 结果定量分析显示该基因在侵染初期显著上调表达，且接种48 h后的表达量是对照的138.6倍。该基因的敲除突变体在营养生长及产孢方面与野生型菌株03-8相比无显著性差异，但致病力与野生型菌株03-8相比显著减弱，且互补突变体致病力近似恢复至野生型水平。 结论 VmNRPS12 基因与苹果树腐烂病菌致病性相关。