LC-MS/MS法测定瑞舒伐他汀在Caco-2细胞上的摄取特性

目的：建立瑞舒伐他汀的超高效液相色谱-串联质谱检测方法,研究其在Caco-2细胞上的摄取特性。方法：采用ACQUITY UPLCBEH C8柱（50 mm×2.1 mm,1.7μm）,流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈（55∶45）,流速为0.2 mL·min（-1）。质谱条件：采用正离子检测,MRM模式。考察时间、温度、药物浓度、pH值及各类抑制剂对瑞舒伐他汀在Caco-2细胞上摄取的影响。结果：瑞舒伐他汀在0.1-500 nmol·L（-1）的范围内呈良好的线性关系（r2〉0.99）;Caco-2细胞对瑞舒伐他汀的摄取在10 min内呈线性,10 min后吸收量逐渐趋于饱和,药物的摄取时间定为10 min;pH值对瑞舒伐他汀的摄取有显著影响,酸性条件下摄取量增加,pH定为6.0;浓度和温度依赖性结果显示,瑞舒伐他汀依靠主动转运和被动扩散2种方式吸收;P-糖蛋白抑制剂维拉帕米对瑞舒伐他汀的吸收基本没有影响;耐药相关性蛋白2（MRP2）抑制剂MK-571和乳腺癌耐药蛋白（BCRP）抑制剂依克立达的存在可增加瑞舒伐他汀的吸收（P〈0.05）;有机阴离子转运多肽OATP2B1抑制剂雌酮-3-硫酸钠可减少Caco-2细胞对瑞舒伐他汀的吸收（P〈0.05）。结论：该法灵敏、快速、简单、专属性强,瑞舒伐他汀在Caco-2细胞中以主动和被动2种形式吸收,部分通过OATP2B1转运进细胞内,MRP2和BCRP对瑞舒伐他汀的吸收有外排作用,而P-gp可能不影响其吸收。