Expressão de ativina A em células-tronco embrionárias de camundongo durante o processo de diferenciação em osteoblastos

A busca de agentes anabolizantes tem sido alvo da pesquisa na terapia da osteoporose. As celulas-tronco embrionarias (CTE), diferenciadas em osteoblastos, tem sido utilizadas para o estudo da fisiologia celular. Protocolos de diferenciacao celular em osteoblastos tem sendo utilizados com sucesso. Um estimulo comum aos protocolos de diferenciacao osteoblastica e a proteina morfogenetica ossea (BMP). Ativina A, um fator de crescimento que tem estrutura e funcao parcialmente homologas ao BMP, apresenta efeitos importantes sobre a proliferacao de osteoblastos e a remodelacao ossea. Contudo, a definicao do momento em que Ativina A passa a agir sobre a minealizacao ossea demanda maiores estudos. OBJETIVO: avaliar a expressao de Ativina A em CTE de camundongo durante protocolo de diferenciacao celular para osteoblastos. MATERIAL e METODOS: adaptamos tecnicas de cultivo celular adotadas em protocolo de diferenciacao de CTE em osteoblastos (Kawaguchi, 2006) e acompanhamos a diferenciacao fenotipica in vitro de uma linhagem de celulas-tronco embrionarias (CT-4), isolada no Laboratorio de Reproducao Humana Prof. Aroldo Fernando Camargos do Hospital das Clinicas da UFMG. Aplicamos o metodo de reacao da cadeia de polimerase (PCR) em tempo real em diferentes fases do processo para evidenciar a expressao genica de marcadores de indiferenciacao celular (Oct-4 e Nanog), marcadores de diferenciacao osteoblastica (osteocalcina, fosfatase alcalina ossea e RUNX-2 e da Ativina A. Correlacionamos a expressao de todos esses genes-alvo em diferentes fases do processo de diferenciacao. RESULTADOS: constatamos que a expressao de marcadores de diferenciacao para a linhagem osteoblastica aumentou a medida em que a cultura avancou no sentido da diferenciacao terminal em osteoblastos. A expressao da Ativina A acompanhou, num relacao direta, o padrao de expressao verificado nesses marcadores de formacao e diferenciacao ossea. O protocolo favoreceu a diferenciacao de precursores celulares de osteoblastos. CONCLUSAO: a Ativina A foi expressa em cultivos celulares de CTE de camundongos em estagio intermediario de diferenciacao em osteoblastos, acompanhando o padrao de expressao celular verificado para outros marcadores de formacao ossea como a osteocalcina.