半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)GnRHR基因全长cDNA的克隆与组织表达分析

2011 
采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)方法,克隆了半滑舌鳎中GnRHR全长cDNA。通过基因全长以及推断的氨基酸序列分析,得知该序列包含一个7tm-1保守结构域,为G蛋白偶联受体家族成员。利用PHYLIP3.5c邻位相连法以及DNAstar中的CLUSTALW方法对相应的氨基酸序列进行了聚类分析和序列相似度分析。结果表明,半滑舌鳎GnRHR与鲈鱼、琥珀鱼、虹鳟以及青鲻等鱼类中的GnRHR聚为一支,亲缘关系较近,且相似度较高,分别为90.1%、89.7%、79.0%以及78.3%,而与高等哺乳动物人、小鼠相似性仅分别为18.8%和16.2%,亲缘关系较远。应用半定量RT-PCR技术分析其组织表达,发现GnRHR广泛表达于各个组织,但表达量差异较大,在性腺、脑和肾中表达量较高,其它组织较弱。
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