Contributions to the diagnosis of pirazinamide resistance in Mycobacterium tuberculosis

Los estudios de susceptibilidad a PZA no se realizan de rutina debido a que el pH acido requerido para lograr la actividad de la droga, afecta el crecimiento de Mycobacterium tuberculosis. La PZA es convertida en su forma activa por accion de la enzima pirazinamidasa (PZAasa) que es codificada por el gen pncA. Tomando en consideracion que la enzima PZAasa es la responsable de convertir la nicotinamida (NIC), droga analoga de la PZA, en su forma activa sin requerir de un pH acido, nos propusimos evaluar dos metodos colorimetricos: Metodo de la Nitrato Reductasa (MNR) y Microensayo Verde Malaquita (MVM) para conocer la susceptibilidad de 102 cepas de Mycocbacterium tuberculosis a la PZA empleando la NIC. Los resultados obtenidos se compararon con el Ensayo Enzimatico de Wayne (metodo de referencia). A las cepas resistentes y las que mostraron resultados discordantes, se les secuencio el gen pncA. Se alcanzo una sensibilidad del 93.75% y una especificidad del 97.67% para el MNR y el MVM. El 87.5% de las cepas resistentes (14/16) mostraron mutaciones en el gen pncA