PCR para la detección de la mutación p.W402X y su identificación en familias cubanas con síndrome de Hurler

Introduccion: La mucopolisacridosis tipo I es una enfermedad genetica de almacenamiento lisosomal con un modo de herencia autosomico recesivo. El sindrome de Hurler es la forma mas severa de presentacion. La causa molecular es la deficiencia en la actividad de la enzima αL-iduronidasa producto de mutaciones en el gen IDUA. La que con mayor frecuencia se ha identificado en Europa y America es la c.1205G>A; p.W402X. En Cuba, hasta este momento, no hay disponibles estudios moleculares. Objetivos: Introducir una tecnica de PCR con digestion enzimatica para la deteccion de la mutacion p.W402X y caracterizar molecularmente a familias con sindrome de Hurler identificadas entre el 2008 y el 2018. Metodos: Se empleo ADN obtenido a partir de sangre seca impregnada en papel de filto. Se estandarizo un PCR con digestion enzimatica producto de modificaciones realizadas al metodo descrito por Scott y otros en 1992. Se estudiaron cinco familias con algun miembro afectado con fenotipo Hurler. Resultados: En todas las familias estudiadas se identifico la mutacion p.W402X; en tanto los pacientes mostraron una actividad enzimatica de αL-iduronidase leucocitaria muy disminuida. Conclusiones: Dentro del espectro mutacional del gen IDUA responsable del sindrome de Hurler en Cuba en el periodo evaluado, la mutacion p.W402X es la mas frecuente. Por lo tanto, la tecnica de biologia molecular introducida debe ser muy efectiva para el diagnostico molecular de esta entidad en el pais.