Développement d'un microsystème bioanalytique intégrant des nanoparticules magnétiques dédié au diagnostic de l'allergie

Dans le cadre du diagnostic de l'allergie, l'approche in vitro la plus utilisee consiste a quantifier les Immunoglobulines E (IgE) du patient par un immunodosage de type enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) a l'aide d'un support conventionnel : la plaque de microtitration. Ces methodes sont utilisees du fait de leur grande specificite et sensibilite. Bien que cette technique soit facile a mettre en œuvre et automatisable, elle necessite des volumes de reactifs et d'echantillons importants (de l'ordre de la centaine de μL) et est limitee par le transfert de masse des analytes vers la surface du support generant ainsi des temps d'analyse eleves. Notre travail a consiste a elaborer un microsysteme bioanalytique integrant des nanoparticules magnetiques et dedie au diagnostic de l'allergie au lait. Les nanoparticules magnetiques fonctionnalisees avec la molecule de capture, l'antigene dans notre cas, sont utilisees en tant que support de l'interaction et permettent ainsi de capturer la cible (IgE) en phase colloidale. La reduction de la taille du support vers des echelles nanometriques permet d'augmenter le rapport surface sur volume et de reduire les distances de diffusion. Ainsi, la cinetique d'interaction entre la molecule de capture et la cible est acceleree par rapport a des supports milli ou micrometriques. Apres l'etape de capture de la molecule cible, les nanoparticules et donc la cible sont separees des molecules interferentes et preconcentrees au sein d'une chambre magnetique avant l'etape de detection. En effet, cette chambre magnetique, composee de billes de fer ferromagnetiques, permet le confinement magnetique des nanoparticules. Ainsi, le microsysteme que nous avons developpe a permis de diminuer les temps d'analyse d'un facteur 25 et de consommer 50 fois moins d'echantillon par rapport a un ELISA conventionnel realise en plaque de microtitration. Ceci est d'autant plus critique que l'on travaille dans un contexte d'allergie au lait qui concerne les jeunes enfants. L'immunodosage des IgE specifiques au sein des serums de patients allergiques au lait et la comparaison des resultats avec une methode de reference a permis de valider ce microsysteme bioanalytique en tant qu'outil de diagnostic de l'allergie.