A Modification of Duncombe's Method and its Application to the Lipolytic Activity Assay of Heparin

The proposed method is a modification of the widely used Duncombe's colorimetric FFA determination. This modified method is based on the change of the extraction solvent system and the amount of sodium chloride added to Cu-TEA reagent. Thus the disadvantages as high and unstable blank values, insufficient extraction of Cu-FFA complex, contamination of the organic phase with copper salts were eliminated. This method was successfully applied for the determination of lipolytic activity of heparin and marine algae extracts. Eine Modifizierung der Duncombe-Methode und ihre Anwendung bei der Bestimmung der lipolytischen Aktivitat von Heparin Bei der vorgeschlagenen Methode handelt es sich um eine Modifizierung der oft angewandten kolorimetrischen Bestimmungsmethode von freien Fettsauren nach Duncombe. Diese Modifizierung basiert auf der Anderung des Extraktionsmittels und der Menge des dem Cu-TEA-Reagenz zugegebenen Natrium-chlorids. Durch die Modifizierung konnten folgende Nachteile beseitigt werden: Zu hohe und instabile Blindwerte, ungenugende Extraktion des Cu-freien Fettsaure-Komplexes und Kontamination der organischen Phase mit Kupfersalz. Diese Methode wurde mit Erfolg bei der Bestimmung der lipolytischen Aktivitat von Heparin und Meeresalgenextrakten angewandt.