花生根瘤菌 Bradyrhizobium sp.MZ5 III型分泌系统调节基因 ttsI 突变体的功能分析

目的探究慢生型花生根瘤菌Ⅲ型分泌系统在花生-根瘤菌互作的功能。 方法本研究采用同源重组和三亲本接合转移的方法，构建 Bradyrhizobium sp.MZ5的Ⅲ型分泌系统调节基因 ttsI 突变体；荧光定量PCR检测添加大豆苷元（Daidzein）和染料木黄酮（Genistein）诱导物后野生型和突变株转录水平上 ttsI 的表达量变化及其差异；蛭石结瘤实验分析 ttsI 基因突变对花生结瘤能力的影响。 结果在转录水平上，大豆苷元和染料木黄酮对MZ5的Ⅲ型分泌系统调节基因 ttsI 的表达具有显著的抑制作用（ P ＜0.05）。在MZ5 △ttsI 突变体中 ttsI 基因的表达量都明显下调，与野生型菌株的相比都达到极显著水平（ P ＜0.001）。蛭石结瘤实验表明，与野生型菌株相比，MZ5 △ttsI 突变体在不同花生品种的结瘤数和地上部干重都显著性降低。根瘤石蜡切片表明，MZ5 △ttsI 突变体在根瘤内的含菌量少于野生型菌株。 结论 Bradyrhizobium sp.MZ5菌株中的Ⅲ型分泌系统在花生-根瘤菌互作中对结瘤有积极的促进作用。