菠萝体细胞胚酵母单杂交 cDNA文库及AcSERK1 启动子相关诱饵载体 的构建

2021 
为筛选与菠萝 AcSERK1 启动子中胚性细胞特异性表达调控区段 ( - 983~ - 881 nt) 的结合蛋白,本研究利用 Matchmaker TM Gold Yeast One-Hybrid System 构建菠萝体细胞胚酵母单杂交 cDNA 文库以及胚性细胞特异性表达调控区段 (SE103) 的诱饵载体。建立的菠萝体细胞胚酵母单杂交 cDNA 文库库容量为 1.25 × 10 7 CFU ,其插入片段平均长度约 1.5 kb ,重组率为 100% 。通过检测, AbA 最低浓度为 600 ng / mL 时,构建的诱饵载体 pAbAi-SE103 在 Y1HGold 酵母菌株中的自激活活性被有效抑制,表明该菠萝体细胞胚酵母单杂交 cDNA 文库以及诱饵酵母菌株 Y1HGold (pAbAi-SE103) ,可用于 AcSRKE1 启动子中胚性细胞特异性表达调控区段互作蛋白的筛选实验,为胚性细胞特异性转录因子的分离鉴定提供数据参考。
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