Lectine modifiée dérivée de wisteria floribunda

2013 
Le probleme decrit par la presente invention est de fournir de maniere stable une agglutinine de Wisteria floribunda (WFA) de qualite elevee et hautement uniforme qui reconnait biologiquement d'importants marqueurs de chaine glucidique, d'elucider en detail l'activite de reconnaissance de chaine glucidique, et d'augmenter encore la specificite de l'activite de reconnaissance de chaine glucidique. Pour ce faire, la presente invention concerne le developpement d'une technique de clonage de genes destines a coder pour l'agglutinine de Wisteria floribunda (WFA) et de production de WFA recombinee presentant la meme activite de reconnaissance de chaine glucidique que la WFA naturelle provenant de bacteries transformees. La WFA naturelle est reduite de sorte a fabriquer ainsi un monomere de WFA reduite destine a reconnaitre specifiquement le residu GalNAc terminal. Une WFA monomere recombinee destinee a reconnaitre la chaine glucidique LDN (GalNAcβ1, 4GlcNAc), qui est importante comme marqueur diagnostique parmi les chaines glucidiques comprenant un residu GalNAc terminal, est fabriquee en introduisant une mutation au niveau de la cysteine dans la WFA recombinee ou par deletion de l'acide amine cote extremite C-terminale.
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