过量表达热休克蛋白C端相互作用蛋白(CHIP)抑制小鼠前成骨细胞系的分化和矿化

2009 
MC3T3-E1细胞系为材料,体外转染pEFNeu-HA-CHIP质粒,Western blot检测热休克蛋白Hs70(HSP70)C端相互作用蛋白(CHIP)表达,建立了稳定过量表达CHIP蛋白的MC3T3-E1/HA-CHIP细胞系。然后用含10mol/L甘油磷酸钠和50μg/mL抗坏血酸的α-MEM条件培养基诱导MC3T3-E1和MC3T3-E1/HA-CHIP细胞系向成骨细胞定向分化,结果表明,诱导期MC3T3-E1/HA-CHIP细胞系中碱性磷酸酶(ALP)的活性比MC3T3-E1细胞中的ALP活性低,ALP染色实验同时证实了这个结果;诱导培养18d后,Von Kossa染色和茜素红染色结果表明,MC3T3-E1/HA-CHIP细胞系中生成的磷酸钙比MC3T3-E1细胞系中生成的磷酸钙少。结果提示,过量表达CHIP蛋白抑制MC3T3-E1细胞的分化和矿化。
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