荷斯坦奶牛随机扩增多态DNA(RAPD)反应条件的优化
2006
以中国荷斯坦奶牛为试验材料,研究了Mg^2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、模板DNA浓度、TaqDNA聚合酶,以及退火温度对RAPD反应的影响,建立一套适合中国荷斯坦牛的最佳RAPD反应体系。反应总体积为20μL,Mg^2+浓度为2.5mmol/L,TaqDNA聚合物浓度为1U,引物浓度为21.zmol/L,dNTPs浓度为4001μmol/L,模板DNA浓度为100ng。PCR反应程序:94℃预变性2min→40循环(94℃性1min→36℃退火1min→72c《=延伸1min)→72℃延伸5min.
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