Diagnostic rapide des hémoglobinuries nocturnes paroxystiques par agglutination en gel

Resume Des anticorps monoclonaux diriges contre les glycoproteines membranaires DAF (antigene CD55) et MIRL (HRF20 ou antigene CD59) ont ete utilises pour identifier les populations erythrocytaires CD55 − et CD59 − des patients atteints d'hemoglobinurie nocturne paroxystique (HNP). Les anticorps NaM16-4D3 (CD55, IgG2a) et NaM77-1E5 (CD59, IgG3) sont faiblement agglutinants et representent des outils de choix pour la quantification par cytometrie en flux indirecte des populations erythrocytaires normales (HNPI) et anormales (HNPII et HNPIII) des patients HNP. Les anticorps NaM125-7H10 (CD55) et NaM123-6G12 (CD59), de classe IgM ont ete selectionnes pour leur pouvoir agglutinant et permettent de separer les cellules HNPI des cellules HNPII et HNPIII par la technique d'agglutination en gel. Une relation directe a ete etablie entre les erythrocytes fluorescents (cytometrie en flux) et les erythrocytes agglutines (agglutination en gel) pour des populations DAF + et DAF − artificielles et pour une serie de patients HNP connus. Ces methodes utilisant des anticorps monoclonaux specifiques representent une alternative aux methodes classiques d'hemolyse. Sur la base de l'analyse de plus de 100 echantillons dont 12 cas de HNP, nous proposons : 1) la caracterisation rapide des erythrocytes CD55 − et CD59 − par agglutination en gel a l'aide des anticorps de classe IgM ; 2) la quantification des populations erythrocytaires normales et anormales par cytometrie en flux.