羊BLG基因5′和3′调控区克隆及其调控GFP基因在乳腺细胞的表达

乳球蛋白(BLG)是反刍家畜的一种主要乳清蛋白质.将外源基因置于BLG 5′调控区下游,能够控制外源基因在动物乳腺的组织特异性表达.现已清楚在BLG 5′端有多个乳核因子1(NF1)和转录因子Stat5的识别位点,此外还存在多个激素作用位点[1].具有这些调控成分的BLG 5′翼端(5′flanking)能够控制外源基因在乳腺的表达,但受整合位点、外源基因结构以及转基因拷贝数及其排列方式的影响[2].研究结果表明,仅含有5′调控区的乳腺表达构件,还不能使外源基因的表达达到内源性BLG的表达水平,因为在5′远端(2.5kb以下)和3′端(3′flanking)还存在与组织特异性表达和增强表达相关的调控成分[3].这些调控成分尚不完全清楚,寻找和确定这些调控成分是目前乳腺表达研究的重点之一.