嗜水气单胞菌转录调控蛋白基因（ahyR）突变株的构建及特性分析

根据GenBank公布的嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila,Ah）转录调控蛋白基因ahyR序列设计1对特异性引物，利用PCR方法扩增AhJ-1株ahyR的部分片段。PCR产物克隆入pMD18-T载体，经序列测定后定向连接入含有卡那霉素抗性（Kan）基因的自杀性质粒pJP5603中，构建重组质粒pJP-ahyR。将鉴定为阳性的重组质粒转化嗜水气单胞菌J-1株感受态细胞，获得1突变株细菌。PCR方法鉴定该突变株为J-1株ahyR基因同源突变株，命名为J-1△ahyR。与J-1株相比，突变株的外膜蛋白图谱和部分生化特性发生改变；胞外蛋白酶、淀粉酶、DNA酶、溶血素等几种主要毒力因子同时丧失；致病力明显降低，对小白鼠的半数致死量大于1．0×10^8 CFU（colony forming units）。该研究为ahyR基因功能的探讨及嗜水气单胞菌弱毒疫苗的研制奠定了基础。