Mikroneutralisationstest zum Nachweis von Teschen‐Talfan‐Infektionen1)

Zusammenfassung Fur Serumneutralisationsteste zum Nachweis von Teschen-Talfan-Infektionen beim Schwein wurde eine Mikrotechnik entwickelt. Der Ansatz der Virus-Serum-Gemische erfolgte unter Beibehaltung der ublichen Reaktionsdaten — 100 KID50 Testvirus, Inkubierung bei 37 °C fur 30 Minuten — in Mikroplatten. Die Reaktionszeit wurde durch Hinzufugen der Zellsuspension (105 PK 15-Zellen/ml) abgeschlossen. Die Virusvermehrung fand damit in Zellkulturen statt, die sich, im Gegensatz zu konventionellen Rohrchentesten, in einer intensiven Vermehrungsphase befanden. Bebrutet wurde in einem CO2-Brutschrank uber 6 Tage. Die errechneten “Mikrotiter” konnen als spezifisch angesehen werden. Sie besasen eine gute Reproduzierbarkeit. Beobachtete Differenzen zu den aus konventionellen Testen gewonnenen Serumtitern waren selten signifikant; sie sprechen dafur, das der Mikrotest eine grosere Sensibilitat als der Rohrchentest besitzt. Die Mikrotechnik kann fur die Durchfuhrung von Neutralisationstesten mit dem Teschen-Talfan-Virus empfohlen werden. Summary The micro-neutralisation test of the detection of Teschen-Talfan infections A micro-technique was developed for a serum neutralisation test to demonstrate Teschen-Talfan infections in the pig. Preparation of the virus-serum mixtures was carried out under the usual conditions — 100 KID50 of test virus, incubation at 37 °C for 30 minutes — on micro-plates. The reaction time was brought to an end by adding the cell suspension (105PK 15 cells/ml). Multiplication of virus occurred in the cell cultures in an intensive phase as compared with conventional tube tests. Incubation was carried out in a CO2 incubator for 6 days. The calculated microtitres can be considered as specific. They possessed a good reproducibility. Differences from the serum titres arrived at by conventional tests were seldom significant; they indicated that the micro-test is more sensitive than the tube test. The micro-technique can be recommended for neutralisation tests with the Teschen-Talfan virus. Resume Microtest de neutralisation pour la mise en evidence des infections de Teschen-Talfan On developpe une micromethode pour les tests de neutralisation du serum pour la mise en evidence des infections de Teschen-Talfan chez le porc. La preparation des melanges virus-serum s'effectue avec les donnees habituelles — 100 KID50 de virus test — incubation a 37 °C pendant 30 minutes — sur microplaques. Le temps de reaction est stoppe par addition de la suspension cellulaire (105 cellules PK 15/ml). La multiplication du virus s'effectue ainsi en cultures de cellules en phase de multiplication intensive, a l'encontre du test conventionnel en eprouvette. On incube en etuve a CO2 pendant 6 jours. Les microtitres calcules peuvent etre consideres comme specifiques. Ils sont reproductibles. Les differences observees par rapport aux titres seriques obtenus avec les tests conventionnels sont rarement significatives; elles indiquent que le microtest est plus sensible que le test en eprouvette. La micromethode peut etre recommandee pour les tests de neutralisation avec le virus Teschen-Talfan. Resumen Prueba de microneutralizacion para identificar infecciones Teschen-Talfan Para pruebas de seroneutralizacion encaminadas a apreciar infecciones Teschen-Talfan en cerdos se desarrollo una microtecnica. La agregacion de las mezclas virus-suero sanguineo acontecia cumpliendo los datos usuales de reaccion — 100 DIC50 de virus reactivo, incubacion a 37 °C durante 30 minutos — en microplacas. El tiempo de reaccion finalizaba al agregar la suspension celular (105 celulas PK 15/ml). Con ello, la multiplicacion de virus acaecia en los cultivos celulares, los cuales se hallaban, en contraposicion a las pruebas convencionales en tubitos, dentro de una fase intensiva de multiplicacion. La incubacion se realizo en estufa con CO2 a lo largo de 6 dias. Los “microtitulos” calculados se pueden considerar como especificos. Poseian una reproducibilidad buena. Las diferencias observadas frente a los titulos sericos obtenidos mediante pruebas convencionales muy raras veces eran significantes; abogan a favor de que el microtest posee una sensibilidad mayor que la prueba en tubitos. La microtecnica se puede recomendar para ejecutar pruebas de neutralizacion con el virus de Teschen-Talfan.