Uso de la lectina de Olneya tesota (PF2) para la purificación y detección histoquímica de una proteína de choque térmico (GP14) de bazo

PF2 es una lectina de las semillas de Olneya tesota (Palo ferro) con afnidad alta hacia carbohidratos complejos triantenarios tetrasialilados. El objetivo de este estudio fue localizar glicoconjugados que interactuen con PF2 en secciones de tejido de bazo y purifcar glicoproteinas usando cromatografia de afnidad con PF2. Se incubaron secciones fnas de tejido de bazo con PF2 biotinilada y se observaron interacciones con linfocitos en los nodulos y estructuras internas de tipo reticular en la pulpa blanca. Se prepararon extractos de bazo para purifcar la glicoproteina detectada, usando dos etapas cromatografcas, intercambio ionico (CMcelulosa) y afnidad (PF2-agarosa). Por electroforesis nativa y con SDS se mostro una glicoproteina monomerica de 14 kDa (GP14). Una vez digerida con una proteasa, se identifcaron seis secuencias peptidicas en la GP14. Cada peptido mostro 100% de homologia a secuencias internas de diferentes proteinas de choque termico de la familia de 70 kDa (HSP70). Esta similitud con las HSP fue confrmada por electrotransferencia e inmunodeteccion usando anticuerpos especifcos para HSP70. En conclusion, la lectina PF2 tiene especifcidad hacia un glicoconjugado denominado GP14 que pudiera ser una glicoproteina de estres del bazo humano, identifcada por primera vez