白木香聚酮环化酶基因 AsPKC1 的克隆及表达分析

聚酮环化酶是植物聚酮合成途径中的关键酶之一，可催化 CoA 类前体直接合成多环结构。作为聚酮合成下游产物的 2 - (2 - 苯乙基 ) 色酮是名贵中药材沉香形成的重要标志物之一，聚酮环化酶可能在其形成过程中发挥着重要作用。本研究基于白木香结香转录组数据，首次克隆了 1 个白木香聚酮环化酶基因，命名为 AsPKC1 ，该基因的编码区共含 1 116 个核苷酸，编码 371 个氨基酸残基。 AsPKC1 编码的蛋白序列与已报道的 PKC 蛋白高度相似，与锦葵科棉花、榴莲和可可树具有较近的亲缘关系，聚于进化树的同一分支；该蛋白的等电点为 9.04 ，分子量为 40.43 kD ，包含 3 个糖基化位点和 28 个磷酸化位点，为非分泌型蛋白， α  螺旋和无规则卷曲组成其主要二级结构。实时荧光定量 PCR 验证实验表明 AsPKC1 的表达具有组织特异性，并且在结香茎干中持续上调表达，其第 9 天在白木香茎干中的表达量为对照组的 6.52 倍。本研究为进一步解析聚酮环化酶基因在沉香标志物 2 - (2 - 苯乙基 ) 色酮合成及白木香结香过程中的作用提供了数据支持。