Comparison of transfection efficiency of NucleofectorTM and liposome transfection techniques for transfection of recombinant plasmid into PA317 cells

目的比较传统的脂质体转染技术与NucleofectorTM转染技术将pLXSN-CTLA4Ig-TRES2-EGFP重组质粒转染入PA317细胞的效率.方法分别用脂质体技术与NucleofectorTM转染技术将pLXSN-CTLA4Ig-IRES2-EGFP重组质粒转染PA317细胞,应用倒置荧光显微镜、流式细胞仪检测转染后PA317细胞绿色荧光蛋白表达情况及阳性细胞率,比较两种方法的转染效率.结果脂质体转染后4、8 h未观察到阳性细胞,转染后12 h阳性率为(0.59±0.2)%,转染后24 h阳性率为(4.39±2.43)%;NucleofectorTM转染技术转染后约4 h观察到阳性细胞,转染后12 h阳性率为(12.27±3.38)%,转染后24 h阳性率为(50.16±2.41)%.两者比较,在转染后12、24 h,后者阴性率显著高于前者(P<0.01).结论 NucleofectorTM技术与传统的脂质体技术比较,是一种具有转染速度快、效率高的新的转染技术.