El efecto de las concentraciones de ácido hialurónico de distinto peso molecular sobre las células del epitelio crevicular

2014 
Motivacion: Las celulas del epitelio crevicular (CEC) expresan en su superficie un glicocalix constituido por carbohidratos unidos a glicoproteinas. Su espesor estimado es de 400 a 500 nm. Es la primera barrera contra la entrada de patogenos y al ser modificada envia senales al interior de la celula. Sirve para la adhesion de leucocitos-epitelio, como sensor de tension de cizallamiento y regulador de la mecanotransduccion. Se ha demostrado que, en enfermedad periodontal, el peso de las glicoproteinas y glicopolisacaridos del glicocalix disminuye(1). Uno de los principales glicopolisacaridos que componen el glicocalix es el acido hialuronico (AH). Se ha demostrado que mejora la infiltracion de celulas de la matriz extracelular en heridas, eleva la produccion de citoquinas proinflamatorias por las celulas inflamatorias, organiza y estabiliza la matriz del tejido de granulacion y neutraliza especies reactivas de oxigeno(2). Es necesario conocer el papel que desarrolla el peso molecular a diferentes concentraciones del AH para su administracion de forma exogena. Hipotesis: La aportacion de AH exogeno de alto peso molecular sobre CEC impediran la degradacion de fibras periodontales interponiendose a las metaloproteinasas (MMP) y niveles bajos de TGF-β1 y CD44. Las cadenas de AH de bajo peso a altas concentraciones, sustituiran a las de alto peso y seran endocitadas, activando genes que promocionan TGF-β1, aumentando CD44 e inhibiendo la sintesis de MMP, a bajas concentraciones, no promocionara TGF-β1 y dejara expuestas MMP. Objetivos: Determinar niveles de CD44, TGF-β1, MT1-MMp, MMP-14, AH citosolico, en celulas del epitelio crevicular, tras la estimulacion con 12-O-tetradecanoilforbol-13-acetato (TPA), tratados con AH de peso molecular bajo, medio y alto a diferentes concentraciones Metodologia: celulas epiteliales porcinas del surco crevicular, aislamiento de ARN, amplificacion por PCR cuantitativa, Western blot y microscopia de fluorescencia.
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