Expression du système de transport Nik spécifique du nickel chez Escherichia Coli

Le locus nikABCDE codant le transporteur ABC specifique du nickel est active en anaerobiose par le regulateur global FNR et reprime en presence d'un exces de nickel par le metalloregulateur NikR code par le gene nikR situe en aval. Nous avons analyse l'organisation et la regulation du locus nik par des approches physiologique, genetique et moleculaire. En plus du controle par l'oxygene, l'operon nikABCDER est soumis a la repression catabolique par le glucose sous controle du complexe CRP-AMPc. Les experiences de mutagenese dirigee et retard sur gel montrent que FNR se fixe specifiquement sur la region promoteur de nikA et que le complexe CRP-AMPc module l'expression de l'operon nik en reprimant la transcription du gene nikR par fixation directe sur son promoteur. Afin d'approfondir le mode d'action de NikR, des mutants aleatoires du represseur NikR affectes soit au niveau du domaine N-terminal de fixation a l'ADN, soit au niveau du domaine C-terminal liant le nickel ont ete isoles et partiellement caracterises