EXPRESSÃO GÊNICA DIFERENCIAL E DESENVOLVIMENTO DE ELISA IN-HOUSE PARA QUANTIFICAÇÃO DA PROTEÍNA FTO

: A obesidade na infância pode vir a ser um fator de risco para uma serie de doencas cronicas na fase adulta, sendo considerada um problema de saude no mundo todo, ja que nas ultimas decadas, a prevalencia tem aumentado nao so nos paises desenvolvidos, mas tambem nos paises em desenvolvimento. A identificacao de expressao diferencial de genes relacionados a obesidade pode informar e ilustrar os processos biologicos relacionados com a regulacao da massa corporal e a identificacao de genes, diferencialmente expressos em individuos obesos e individuos de baixo peso. Alem disso, existe a necessidade de mensurar marcadores proteicos decorrentes destes genes, no intuito de pesquisar a associacao com a obesidade. Um desses marcadores pode ser a proteina associada a massa gorda e obesidade (FTO, do ingles fat mass and obesity associated ), que tem seus mecanismos moleculares e celulares ainda em grande parte desconhecidos. A expressao de FTO ocorre em diversos tecidos, especialmente no hipotalamo, hipofise e glândulas supra-renais e o gene que a codifica, o gene FTO , encontra-se na regiao cromossomica 16q12.2, possui 9 exons e 8 introns, num total de 2.348 pares de base e foi geneticamente associado com obesidade e diabetes mellitus . Objetivo : identificar genes diferencialmente expressos entre adolescentes obesos e adolescentes de baixo peso, alem de desenvolver um ensaio imunoenzimatico in-house para deteccao e quantificacao da proteina FTO. Metodo : Sera selecionada uma amostra de conveniencia, composta por 10 escolares de baixo peso (IMC dara a partir da extracao de mRNA, para posterior sintese de DNA complementar (cDNA) e entao, proceder com a Transcricao Reversa - Reacao em Cadeia da Polimerase em tempo real (qRT-PCR), utilizando SYBR Green™ no equipamento StepOne Plus ® (AppliedBiosystems, Foster City, CA, EUA). O desenvolvimento do ELISA sera do tipo sanduiche com a aquisicao de anticorpo comercial (RD Adolescentes; Expressao genica; ELISA