Real time RT-PCR与直接免疫荧光法对鼠肺中汉坦病毒检测效果比较

目的 比较Real Time RT-PCR与直接免疫荧光法检测鼠肺中汉坦病毒（hantavirus,HV）带毒率的差异,为进一步完善实验室检测方案提供依据.方法 2015年秋季内蒙古自治区呼伦贝尔市莫力达瓦旗肾综合征出血热（hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS）疫区捕获啮齿类动物,对捕获的啮齿类动物进行分类鉴定.取122只鉴定后的鼠进行无菌解剖取肺组织,提取RNA,用Real Time RT-PCR扩增汉坦病毒目的基因,同时将122份肺组织冷冻切片,进行直接免疫荧光试验（direct immunofluorescenee,DIF）.结果 呼伦贝尔市莫力达瓦旗HFRS疫区是以黑线姬鼠为主的混合疫区,捕获鼠类8种共422只,鼠类平均密度为14.81％.在检测的122份鼠肺中,Real Time RT-PCR结果显示：27份鼠肺样品检测到HV核酸阳性,且均为HTNV型,鼠带毒率为22.13％,其中黑线姬鼠16份,占阳性鼠的59.26％.直接免疫荧光法结果为：3份鼠肺样本为阳性,鼠带毒率为2.459％,3份阳性鼠肺均为黑线姬鼠.利用统计软件SPSS 14.0进行统计学分析,两种方法检测结果有统计学差异（x2=21.892,P＜0.01）.结论 与DIF法相比,Real Time RT-PCR检测HV阳性率更高,采用DIF方法可能会低估内蒙古自治区肾综合征出血热疫区的疫情情况.